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本试剂盒是一种借助辣根过氧化物酶(HRP)反应，可用于免疫组化显色、原位杂交显色或Western、Southern、Northern、EMSA等膜显色的试剂盒。DAB是辣根过氧化物酶的常用底物。在辣根过氧化物酶的催化下，DAB会产生棕色沉淀。该棕色沉淀不溶于水和乙醇，可用于正常脱水封片。

本制品采用特殊配方，利用DAB和多种金属离子能形成不同颜色的稳定复合物的原理，在配方中额外添加了金属盐对DAB反应进行了增敏调色。能达到比常规DAB显色清晰度更高的染色结果，染色结果为蓝色至蓝黑色，适合于蛋白印迹、免疫组织化学和免疫细胞化学、斑点印迹和生物芯片等的染色和显色反应。

通常建议每张组织切片添加80～100μL DAB显色工作液，每cm2印记膜添加40～50μL DAB显色工作液，本试剂盒可用于约600张组织切片染色或1200cm2的印记膜染色。

• 洗涤液可使用1×PBS、1×PBST及其他免疫组化或膜显色中常用清洗缓冲液。
  
• 溶液A应为淡黄色至紫红色透明液体，新配的工作液应为淡粉色或淡红色，随时间延长会逐渐变蓝，如颜色过深或出现沉淀，请勿使用。
  
• DAB有潜在致突变作用，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
  
• 如显色不佳或长期不用无法确认试剂状态，可取稀释好的二抗孵育液和工作液按照1∶3混匀，静置观察，混合液应在2min内变蓝色至蓝黑色，10min内沉淀。

• 对于组织切片或蛋白质印记膜，在与辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗体或其它形式的探针孵育后，用适当洗涤液洗涤3～5次，每次3～5分钟。
  
• 将溶液A、B、C按照1∶1∶18的比例混合均匀，即为DAB工作液，建议4h内使用。
  
• 向组织切片或膜上加入适量DAB显色工作液，确保能充分覆盖样品。
  
• 室温避光孵育1～30分钟，显色时间过长可引起本底增高，故应密切观察显色过程(一般3～10分钟最理想)，并在本底较浅且达到适当显色强度时以流水漂洗终止显色反应。
  
• 对于组织切片或细胞样品，显色反应终止后可对其进行其他染料(常用核固红染色液)复染。对于膜，显色反应终止后，可以室温晾干避光保存。